Inertsil Amide色譜柱分析檢測益母草中的鹽酸水蘇堿

中國藥典2010年版（一部）中，對益母草中鹽酸水蘇堿的測定有如下描述：
色譜條件與系統適用性試驗 以丙基酰胺鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-0.2%冰醋酸溶液（80:20）為流動相，用蒸發光散射檢測器檢測，理論板數按鹽酸水蘇堿峰計算不得低于6000。
對照品溶液的制備取鹽酸水蘇堿對照品適量，精密稱定，加70%乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本品粉末（過三號篩）約lg，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%乙醇25ml，稱定重量，加熱回流2小時，放冷，再稱定重量，用70%乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。
本品按干燥品計算，含鹽酸水蘇堿(C7H13O2．HCl)不得少于0.50%。
　為什么需要用丙基酰胺柱來測鹽酸水蘇堿呢？丙基酰胺硅膠基質的柱子是什么柱子呢？

　首先我們要了解鹽酸水蘇堿的特性，從鹽酸水蘇堿的結構式來看，即可知道鹽酸水蘇堿的極性是非常大的，普通的反相色譜對它的保留分離能力較弱甚至不保留，而親水型作用色譜柱一般固定相為極性的固定相，因此能為強極性的化合物提供良好的保留，因此是分離這類化合物的極好選擇。 
　親水作用色譜（HILIC）作為一種分離極性化合物的液相色譜模式，是一種以極性固定相（如硅膠、烷基酰胺基、二羥丙基，氨基鍵合硅膠等）及水-極性有機溶劑為流動相的色譜分離模式，它與正相色譜相似，水是強溶劑，極性化合物比非極性化合物的保留時間長，與反相色譜的保留順序恰好相反。強極性化合物的分離問題引起了各個研究領域的重視，如藥物分析、代謝組學、蛋白質組學等研究領域都不同程度地涉及強極性化合物的分離問題，近年來，HILIC 越來越受到關注和重視。
　烷基酰胺鍵合硅膠克服了傳統正相色譜柱在水相條件下不穩定的缺點，其梯度條件通常是初始為高比例有機相，逐步加大水相含量，極性丙基酰胺鍵合硅膠的HILIC色譜柱在反相條件下，可以有效的保留極性化合物，我公司Inertsil Amide色譜柱，就是一樣一款非常適合于益母草中鹽酸水蘇堿測定的柱子，測定方法及譜圖如下：

1、分析條件

色譜柱：Inertsil Amide 250*4.6*5
柱溫：30℃
流速：1.0ml/min
進樣量： 20ul
檢測器：Alltech 3300 ELSD（漂移管溫度：50度、載氣流量1.5L/min）
流動相：80%乙腈+20% 0.2%冰醋酸溶液
進樣濃度：藥材提取液 1g/25ml提取液